Почему у собаки распределение эритроцитов в крови понижено

Оценка состояния эритроцитов — важный этап в исследовании мазков крови. При системном подходе она даёт исследователю много информации.

Микроскопия эритроцитов является дополнительным анализом при подсчёте количества клеток и формулы крови, который важно учитывать при постановке диагноза. В определённых случаях одна только оценка эритроцитов позволяет поставить конкретный диагноз.

Таблица. Исследование эритроцитов: оценка, распределение их размера, их формы и окраски

Плотность	Размер	Форма	Цвет	Включения, паразиты
Снижение: анемия	Макроцитоз: регенеративная анемия, лейкоз кошки и т.д.Микроцитоз: дефицит по содержанию железа, порто-системное шунтирование	Акантоциты, шизоциты, кератоциты: гемангио-саркома, ДВС* синдром и т.д.Сфероциты: гемолиз опосре-дованный иммунной реакцией Эхиноциты: часто артефакт	Гипохромия: дефицит железа	окислительное повреждение регенеративная анемия и т.д. Паразиты: Babesia canis, Mycoplasma hoemofelis
*ДВС — диссеминированное внутрисосудистое свёртывание

Размер

Увеличение размера

Макроциты — эритроциты большого размера, превышающего размер зрелых эритроцитов. Макроциты, обычно с наличием полихроматофилии, обнаруживают при регенеративной анемии (вариацию объёма эритроцитов называют анизоцитозом).

Снижение размеров

Микроциты (эритроциты малого размера) выявляют при анемии, вызванной дефицитом железа (алиментарный дефицит, хронические кровотечения), секвестрации железа в крови (при синдроме воспаления, впрочем, секвестрация железа часто ведёт к нормоцитарной нормохромной анемии), портосистемном шунтировании и, что наиболее странно, могут быть вариантом нормы у некоторых пород собак, таких как акита-ину.

Форма

Сфероциты

Сфероциты — это эритроциты малого размера, которые при сравнении их в тонком слое мазка с другими эритроцитами имеют более интенсивную окраску без признаков просветления в центре. Эритроциты у основания мазка крови, естественно, более плотные и без признаков просветления в центральной их части, можно спутать со сфероцитами.

У собак сфероциты, часто в сочетании с агглютинацией, обычно обнаруживают при иммунной гемолитической анемии (более чем у 80% больных собак присутствует выраженный сфероцитоз и более чем у 30% при этом отмечается агглютинация). О сфероцитозе в основном говорят, когда в поле зрения микроскопа отмечают более 20% сфероцитов.

У кошки, несмотря на то что иммунная гемолитическая анемия встречается очень редко, сфероциты трудно дифференцировать от эритроцитов, потому как, последние в центральной их части не имеют просветления.

Акантоциты

Акантоциты — эритроциты, которые при анализе их под световым микроскопом имеют плотную цитоплазму, а также неодинаковую по длине и ширине поверхность мембраны. Их формирование может иметь вторичную природу в связи с увеличением соотношения в мембране холестерина к фосфолипидам при гиперхолестеринемии, липидозе печени или при холангиогепатите у кошек, а также в случае портосистемного шунтирования у собак. Формирование акантоцитов может также вызвать микроангиопатия, провоцирующая нарушение эритроцитов (ДВС-синдром, гемангиосаркома, гломерулонефрит и т. д.).

Кератоциты и шизоциты

Кератоциты — это эритроциты, которые имеют две проекции острых конвергентных (встречающихся) краёв, соединяющихся на одном конце клетки . Шизоциты имеют сильно повреждённую структуру и появляются в виде фрагментов эритроцитов с острыми краями. Как и акантоциты, шизоциты наблюдают преимущественно при микроангиопатии .

Эхиноциты

Эхиноциты — это шестерёнчатые (щетинистые) эритроциты с проецированием тонких и коротких острых кончиков одинаковой длины, распространяющихся одинаково по поверхности мембраны. Обычно их присутствие является вторичным морфологическим артефактом, обусловленным избыточным введением ЭДТА и продолжительной экспозицией с момента забора крови до нанесения её на предметное стекло. Следовательно, присутствие эхиноцитов не является признаком какого-либо заболевания.

Так или иначе, число их может возрасти при определённых патологических состояниях, например в случае азотемии .

Цвет

Полихроматофилы и условия их появления обусловлены регенеративной анемией.

В центре гипохромных зрелых эритроцитов имеется более выраженное просветление (бледность), потому что в отличие от нормы они располагают более низкой концентрацией гемоглобина. Их присутствие ассоциируется в основном с железодефицитной анемией (например, при хронических наружных кровотечениях) .

Нарушенные структуры и эритробласты

Нарушенные структуры. Тельца Гейнца и эксцентроциты

Тельца Гейнца (ТГ), как и эксцентроциты, образуются вследствие окислительного повреждения эритроцитов.

ТГ проявляются в виде розовой протуберанции (выступа) или бледного включения возле мембраны . Эксцентроциты — это эритроциты уродливой формы с наличием светлой «растущей» структуры, находящейся сбоку мембраны.

У собаки и кошки причина анемии с присутствием ТГ и эксцентроцитов имеет алиментарную природу (например, при поедании лука), а также медикаментозную (парацетамол и т. д.) или токсическую (цинк и т. д.) (M. Desnoyers, 2000; J.W. Harvey, 2000). У здоровой кошки редко встречаются эритроциты, которые могут иметь ТГ (до 5%). Их число может возрасти у больной сахарным диабетом кошки, не страдающей анемией, гипотиреоидозом и лимфомой.

Тельца Говелла-Жолли

Тельца Говелла-Жолли — это фрагменты ядер, которые не элиминировались из эритроцитов, и встречаются при регенеративной анемии или в результате проведения спленэктомии. Их также наблюдают иногда в нормальном состоянии, в основном у кошек .

Паразиты

В эритроцитах можно обнаружить персистенцию паразитов. Два встречаются часто: Babesia canis у собак и Mycoplasma haemofelis (старое название: Hemobartonella felis) у кошек . Первый имеет форму груши, часто бывает парным и при окрашивании по Романовскому-Гимзе имеет цвет от прозрачного до бледно-голубого с красным пурпурным ядром. Второй, Mycoplasma haemofelis, прикрепляется к поверхности эритроцитов, окрашивается в темно-голубой цвет (окраска по Романовскому-Гимзе) и может иметь форму кокка, кольца или палочки.

Эритробласты

Эритробласты — это ядросодержащие эритроциты, в стадии неполной зрелости. В основном они высвобождаются из костного мозга при достаточно выраженной регенерации у анемичных животных. Их появление в кровеносном русле также может указывать на нарушение костного мозга или на патологию селезёнки .

Исследование эритроцитов позволяет дать серьёзную информацию, которая необходима для постановки диагноза. Например, выявление гипохромной анемии, которая чаще всего развивается при дефиците железа, позволяет задуматься о хроническом наружном кровотечении. Наличие акантоцитов в системе гемоциркуляции указывает на механическое повреждение эритроцитов, ассоциируемое с гемангиосаркомой, а также почечной гипертензией и т. д. Таким же образом иногда может быть поставлен окончательный диагноз. Так, регенеративная анемия в сочетании со сфероцитозом и агглютинацией, позволяет установить иммунную гемолитическую анемию.

Основные положения

— Тест на солевой раствор позволяет дифференцировать агглютинацию от образования «монетных столбиков».

— Регенеративная анемия характеризуется присутствием множества полихроматофилов в мазке крови.

— Присутствие сфероцитов и агглютинация являются характерным признаком иммунной гемолитической анемии у собак.

— Присутствие эхиноцитов часто является артефактом при подготовке мазка.

Введение

Основная функция эритроцитов — транспорт кислорода (O₂) клетками организма и углекислоты (CO₂) из организма, участии в буферных системах ионов водорода, поддержание сосудистой целостности и участие в процессах коагуляции.

Анемия — снижение в системном кровотоке уровня циркулирующих эритроцитов. Анемия кошек и собак — это не первичный диагноз, а вторичный процесс, который может развиваться по трем причинам: 1. При снижении выработки и высвобождения эритроцитов в костном мозге; 2. При повышенной утилизации эритроцитов в организме животного (пр. гемолиз); 3. При кровопотере (наружной или внутренней). Т.е., разграничение точного вида анемии идет с учетом уровня производства эритроцитов (гемопоэз) в соотношение со скоростью их разрушения (гемолиз) или потери (внешняя среда а также третье пространство). В ряде случаев, анемия может развиваться при комбинации различных факторов – снижения производства эритроцитов, укорочения их срока жизни и кровопотери.

Анемия как таковая, достаточно часто диагностируется на приеме в ветеринарной клинике (от 10% до 30% пациентов), она может сопровождаться различными клиническими проявлениями (пр. бледность слизистых оболочек, общая угнетенность, непереносимость, нагрузок, сердечные шумы, слабость наполнения пульсовой волны, гемоглобинурия, пика (pica) или протекать без внешних признаков и диагностироваться исключительно лабораторно. По сути, определение анемии как таковой и ее точные характеристики определяются в клинико-диагностической лаборатории, и диагноз анемии — исключительно лабораторный.

Анемии у животных подразделяются на два основных класса – регенеративная и нерегенеративная. Регенеративная анемия – снижение количества эритроцитов с наличием функциональной способности костного мозга к производству и высвобождению эритроцитов. Нерегенеративная анемия – снижение количества эритроцитов по причине или в сочетании со снижением способности костного мозга к производству и/или высвобождению эритроцитов. Ниже представлены основные причины анемий кошек и собак встречающихся на приеме в ветеринарной клинике.

Таблица. Характерные причины анемий кошек и собак.

Регенеративная анемия

Нерегенеративная анемия

Анемия воспалительных заболеваний Анемии хронического почечного и печеночного заболеваний Гипотиреоз собак и гипоадренокортицизм Нерегенеративная имммуно-опосредованная гемолитическая анемия Истинная эритроцитарная аплазия Миелодиспластический синдром Конгенитальный дизэритропоэз Апластическая анемия Воспаление/некроз костного мозга Миелофиброз Лейкемия Пролиферативные нарушение макрофагов. Токсичность эстрогена, сульфадиазина, фенилбутазона и др. Инфекции (эрлихиоз, ВЛК, ВИК, парвовирус собак и кошек)

Ниже представлен один из диагностических подходов после выявлении у кошек и собак, он следует из оценки тяжести анемии, подсчета количества ретикулоцитов, оценки морфологии мазка крови мозга и попытки морфологической классификации.

Оценка тяжести анемии

Первый шаг при оценке анемии у животных в ветеринарной клинике — определение ее тяжести. Для этого могут быть использованы такие показатели как гематокрит (Hct), PCV, уровень гемоглобина и количество эритроцитов. PCV — процент цельных клеток состоящих из эритроцитов, получается при помощи микрогематокритной трубки и центрифуги. Гематокрит вычисляется автоматическими анализаторами после определения среднего размера эритроцита и количества эритроцитов. PCV и ге матокрит обычно взаимозаменяемые показатели и служат основой оценки тяжести анемии. Исключение для этого правила встречается при микроцитарной гипохромной анемии и макроцитарной гипохромной анемии.

При определение тяжести анемии, интерпретация PCV и гематокрита должна проводится исходя из статуса гидратации животного, обычно это достигается при измерении общего белка плазмы на рефрактометре. Дегидратация (обезвоживание, гемоконцентрация) обычно сопровождается снижением объема плазмы и повышением уровня общего белка, что ложно повышает гематокрит животного (относительная полицитемия). Дегидратация может маскировать умеренные формы анемии, чаще это происходит на начальных этапах диагностики. Поэтому, статус гидратации животного должен быть нормализован в течении некоторого времени и только после этого может быть проведена оценка уровня эритроцитов (так, при кровотечении, данное время может занять до 1-2 дней). Гипергидратация напротив сопровождается повышением общего уровня плазмы и снижением общего белка, данный феномен обычно проявляется в ложном снижении уровня эритроцитов, что также требует определенной коррекции. Некоторые трудности отмечаются при гипопротеинемии на фоне кровотечения, заболеваниях кишечника, заболеваниях почечных клубочков и сходных патологиях сопровождающихся потерей белка.

У собак, определенную роль на уровень гематокрита может оказывать тонус селезенки, быстрое ее сокращение может вызывать некоторые изменения в распределении эритроцитов, потому как она содержит до 20%-30% массы красных кровяных телец. У кошек селезенка не принимает столь активного участия в циркуляции эритроцитов, и данный феномен отмечается редко. Выброс эритроцитов из селезенки развивается достаточно быстро, и в норме отмечается у здоровых животных. Меньшее значение на определение уровня эритроцитов оказывает расслабление селезенки с выведением эритроцитов из циркулирующего русла (пр. наркоз).

Существует некоторая разница по течению острой и хронической анемии, при медленном развитии снижения уровня эритроцитов у животного происходит физиологическая адаптация к гипоксемии и они могут в течение недель и месяцев жить с минимальными клиническими проявлениями (пр. гематокрит 5%-8% при хроническом развитии анемии).

При определении тяжести анемии, следует помнить о возрастных и породных отличиях уровня эритроцитов у животных, так у щенков  в возрасте 2-х и 8-недельного возраста уровень гематокрита обычно соответствует 28%,  у гончих гематокрит обычно имеет более высокие показатели по сравнению с общей популяцией собак.

Трудно оценить тяжесть анемии при метгемоглобинемии, когда общая масса гемоглобина животного находится в пределах нормы, но происходит значительное снижение его способности переносить кислород (пр. отравление угарным газом).

Умеренные по тяжести анемии обычно развиваются вторично к другим негематологическим проблемам (пр. анемия воспалительных заболеваний; неоплазия, почечная и печеночная недостаточность, эндокринные патологии), при этом, основные диагностические и терапевтические усилия должны быть направлены на поиск первичных патологий. Выраженные и тяжелые анемии часто указывают на первичное гематологическое заболевание и требуют активных диагностических и терапевтических действий.

Подсчет ретикулоцитов

Первичное суждение об эритропоэзе животного и состоянии функции костного мозга проводится по его способности производить ретикулоциты. При этом могут возникнуть некоторые трудности, и для более полной оценки используется анализ мазка крови и цитологическое исследование костного мозга.

Ретикулоциты – не зрелые эритроциты высвобождаемые в повышенном количестве из нормального костного мозга в ответ на снижение количества эритроцитов. Ретикулоциты содержат остаточные интрацитоплазматические органеллы (рибосомы, РНК) где продолжается синтез гемоглобина, при окраске новым метиленовым голубым (NMB) или бриллиантовым крезиловым голубым (BCB) при световой микроскопии определяются темно-голубые гранулы.

Ретикулоциты кошек подразделяются на две формы — агрегатные и пунктатные, что отражает значительную разницу в скорости их созревания (в отличии от собак). Вначале у кошек происходит выброс агрегатных ретикулоцитов, которые очень быстро (в течение 12 часов) созревают до пунктатных форм. При оценке мазка крови кошек, агрегатные ретикулоциты содержат более 12-15 точек (капель) вплоть до невозможности определить точное их количество, пунктатные ретикулоциты кошек содержат от 3-12 точек (капель) интрацитоплазматических включений. Пунктатные ретикулоциты достаточно медленно (10-12 дней) созревают в организме кошки до зрелых эритроцитов и скапливаются в кровотоке в значительных количествах (по сравнению с агрегатными). Агрегатные ретикулоциты кошек являются лучшим показателем степени регенерации (по сравнению с пунктатными формами) и абсолютное число агрегатных ретикулоцитов более значимый показатель регенерации чем корректируемый процент ретикулоцитов или индекс их продукции. Пунктатные ретикулоциты кошек отражают общий регенеративный ответ и обычно не подсчитываются.

Ни один из современных автоматических анализаторов не способен точно определить количество пунктатных ретикулоцитов кошек, и при оценке регенеративного ответа следует полагаться исключительно на ручной подсчет. У них также возникают значительные трудности при идентификации типов ретикулоцитов. По паттерну ретикулоцитов кошек может быть предположено время развитии анемии, порядка 4 дней с момента начала развития анемии у кошек достигают пика агрегатные формы ретикулоцитов, затем их количество снижается и продолжается рост количества пунктатных ретикулоцитов. Полихроматофилы кошек с мазком окрашенным красителями Райта обычно отражает количество агрегатных ретикулоцитов.

Собаки также как и кошки, вначале высвобождают агрегатные ретикулоциты, которые очень быстро проходят через стадию пунктатных ретикулоцитов (до 24 часов) и созревают до зрелых эритроцитов. В результате быстрого созревания, ретикулоциты собак первичного состоят из агрегатных форм, они содержат значительные массы преципитированной РНК с незначительным количеством пунктутаных форм. Исходя из вышесказанного, ретикулоциты собак не подразделяются на две формы, ввиду малого количества пунктатных форм и отсутствия их клинического значения в диагностике анемии. Большинство лабораторий не подсчитывают эритроциты как ретикулоциты только с одной или двумя индивидуальными гранулами, а включают их в эритроциты с зернистыми артефактами или преципитатом. Ретикулоциты собак примерно равны полихмроматофилам наблюдаемым при окраске мазка красителями Райта, различные краски варьируют в способности проявлять полихроматофилы.

При анемии кровопотери или гемолитической анемии, костный мозг должен увеличить количество ретикулоцитов согласно тяжести анемии. Максимальная выработка ретикулоцитов отмечается в течение 3-7 дней с начала острого эпизода анемии. Если на начальном этапе количество ретикулоцитов мало, но в мазке крови присутствуют другие признаки регенерации (пр. анизоцитоз, полихромазия) — проводится повторная оценка ретикулоцитов (через 3-5 дней). Подсчет ретикулоцитов проводится при гематокрите менее 30 у собак и менее 20 у кошек. Ниже представлена таблица определения степени регенерации в зависимости от количества ретикулоцитов в периферической крови собак и кошек.

При оценке ретикулоцитов используются такие показатели как абсолютное количество ретикулоцитов на микролитр крови, ретикулоцитарный индекс (RI), процент ретикулоцитов (RP), и корректированный процент ретикулоцитов, или могут быть оценены наблюдением за полихроматофилами в мазке крови (см. ниже). Ретикулоциты — больше эритроцитов (пр. макроциты) и имеют меньшую концентрацию гемоглобина чем зрелые эритроциты. Поэтому, описание в обычном мазке повышенного количества макроцитарных гипохромных эритроцитов, обычно отражает ретикулоцитоз и регенеративный ответ костного мозга.

Процент ретикулоцитов при ручном подсчете.

Для микроскопического определения количества ретикулоцитов, кровь с ЭДТА смешивается с витальной краской. Чаще всего используется новый метиленовый голубой (1% NMB + 1,6% антикоагулянта натрия оксалата) и бриллиантовый крезиловый голубой (BCB; 1% солевой раствор). Кровь и краска смешиваются в соответствующих пропорциях и инкубируются в течение 10 минут для NCB или 30 минут для BCB. Остаточный эндоплазматический ретикулум в ретикулоцитах представлен как темно-голубые гранулы. Мазок высушивается и определяется процент ретикулоцитов на 1000 безъядерных эритроцитов. Зрелые эритроциты бедны РНК и не окрашиваются. Ядерные эритроциты считаются отдельно.

Ручной подсчет во многом зависит от оператора, и возникают различные вариации по сравнению с автоматическим подсчетом. Однако, пунктатные ретикулоциты кошек не подсчитывается на сегодня ни одним автоматом, поэтому, только ручной метод может обеспечить должную информацию. Соответствующая оценка кошачьего эритроидного ответа проводится по определению процента пунктатных ретикулоцитов (10%, 25%, 50%, 75%, или 90%). Ретикулоциты собак определяются как имеющие более 2 капель (точек). Ретикулоциты собак могут иметь несколько точек, но собаки не имеют столько пунктатных ретикулоцитов как кошки, что может значительно изменить интерпретацию.

Процент ретикулоцитов при автоматическом подсчете.

Подсчет количества ретикулоцитов проводится различными марками гематологических анализаторов, с различной степенью чувствительности и достоверности. частая ошибка в интерпретации ретикулоцитов — заключить что анемия регенеративная на основании легкого повышения уровня ретикулоцитов на автомате. Еще раз следует сказать, что оценка ретикулоцитов кошек — исключительно ручная работа врача лаборанта.

При анемии, процент ретикулоцитов несколько переоценивает силу эритропоэза. Абсолютное количество ретикулоцитов — более постоянный индикатор истинного регенеративного ответа.

Абсолютное количество ретикулоцитов.

Абсолютное количество ретикулоцитов служит лучшим индикатором гематопоэтического ответа, по сравнению с процентом ретикулоцитов. Суть в том, что при анемии, количество зрелых эритроцитов различно снижено, поэтому процент ретикулоцитов переоценивает гематопоэтический ответ. Абсолютное количество ретикулоцитов вычисляется умножая процент ретикулоцитов на количество эритроцитов, посему он подгоняет процент ретикулоцитов под тяжесть анемии.

Корректированный процент ретикулоцитов

Корректированный процент ретикулоцитов (CRP) не требует подсчета эритроцитов, он вычисляется исходя из формулы: CRP – (процент ретикулоцитов) х (определяемый гематокрит) / (нормальный гематокрит). Нормальный гематокрит у собак равен 45%, у кошек — 37%. Корректированный процент ретикулоцитов (CRP) >1% поддерживает регенеративный ответ.

Ретикулоцитарный индекс или ретикулоцитарный индекс продукции (RI или RPI)

Ретикулоцитарный индекс продукции (RPI) используется у собак для компенсации молодых ретикулоцитов (>24 часов времени созревания) в ответ на тяжелую анемию. Данный показатель вычисляется исходя из формулы RPI = (процент ретикулоцитов) х (гематокрит:45) х (1:время созревания). Время созревания исчисляется исходя: гематокрит 45% = 1 день, гематокрит 35% + 1,5 дня, гематокрит 25% = 2 дня, гематокрит 15% = 2,5 дня. При RPI >1.0 = средняя регенерация, при RPI >3 = выраженный регенеративный ответ.

Оценка периферического мазка крови

Полихромазия

Полихромазия – повышение количества полихроматофилов в мазке крови, у собак они эквивалентны ретикулоцитам и полихромазия достаточно хорошо отображает ретикулоцитоз. Полихроматофилы больше чем зрелые эритроциты и имеют более голубую окраску по причине присутствия рибосом. Полихроматофилы определяются как полиокрашенные клетки с оранжевым окрашиванием цитоплазмы и голубым окрашиванием РНК. Именно агрегатные ретикулоциты при обработке красками Райта выглядят как полихроматофилы, их наличие подходит для оценки ретикулоцитоза собак, но слабо применимо у кошек по причине важной роли пунктатных ретикулоцитов. Усиление полихромазии в первые 3-7 дней с момента развития анемии отображает степень и силу эртиропоэза.

Макроцитоз

Макроцит – эритроцит большего размера, размер определяется при определении среднего объема эритроцита (MCV) или при цитограмме эритроцитов. Ретикулоцитоз – наиболее частая причина макроцитоза, особенно через 3-5 дней после наступления анемии, но зрелые макроциты могут также высвобождены в период ускорения эритропоэза. Один из авторов, верит что макроцитоз, и особенно процент макроцитарных гипохромных эритроцитов – более чувствительный индикатор повышенного эритропоэза в регенеративном ответе, чем полихромазия и ретикулоцитоз.

Другие причины макроцитоза — искусственное набухание эритроцитов в ЭДТА при длительном хранении, врожденный дисэритропоэз пуделей, стоматоцитоз, и ВЛК.

Анизоцитоз, широта распределения эритроцитов, широта распределения гемоглобина.

Анизоцитоз – вариабельность размера эритроцитов. Широта распределения эритроцитов подсчитывается автоматом и определяет степень анизоцитоза. Частая причина повышения анизоцитоза – регенеративная анемия с высвобождением ретикулоцитов и макроцитов. Широта распространения гемоглобина нумерически описывает вариации эритроцитов основываясь на концентрации гемоглобина. Повышение широт служит индикатором что эритроциты имеют повышенную вариабельность.

Ядерные эритроциты, базофильная зернистость, тельца Хауэла-Джолли

Другие гематологические находки при регенеративной анемии обычно включают тельца Хауэла-Джолли, ядерные эритроциты и базофильную зернистость. Данные изменения хорошо определяются в мазке, но не являются количественными и специфическими индикаторами регенерации эритроцитов, в отличии от ретикулоцитов и макроцитарных гипохромных эритроцитов. Количество ядерных эритроцитов исчисляется по разному (относительно, абсолютно), но они не лучшим образом отражают эритропоэз в костном мозге, могут отмечаться при сепсисе и нейтропении, заболеваниях селезенки, внемозговом гематопоэзе, тепловом ударе, сепсисе, отравлении свинцом, гипоадренокортицизме, лейкемии и некоторых патологиях костного мозга.

Базофильная зернистость – чаще связана с регенеративной анемией и редко вызывает настороженность, она также может развиваться при отравлении свинцом но не считается специфичным и чувствительным методом диагностики данного отравления у собак (лучше определяется при токсикологическом тестировании).

Тельца Хауэла-Джоли – малые круглые ядерные остатки в эритроцитах. Они могут наблюдаться при повышенном эритропоэзе или при снижении их селезеночного удаления. Селезенка кошек менее эффективна в удалении эритроцитов, и поэтому тельца Хауэлла-Джоли более характерны для кошек чем для собак. Лечение стероидами или болезнь Кушинга снижает фагоцитирующую активность и количество телец Хауэла-Джоли. Также, данные тельца отмечаются у пуделей с макроцитозом, могут быть множественными и диспластичными.

Ниже представлена суммирующая таблица изменения мазка периферической крови кошек и собак при анемии.

Таблица. Морфологические изменения эритроцитов при анемии собак и кошек, обладающих клинической значимостью.

Изменение	Описание	Клиническое значение
Изменение формы
Сфероциты	Малые, плотные, сферические клетки с недостатком центральной бледности
Клетки тени	Остаточная мембрана эритроцитов	IMHA: внесосудистый гемолиз
Эксцентроциты	Эксцентрически расположенные чистые зоны со смещенным гемоглобином	Оксидативное повреждение
Кератоциты	Две одинаковые рогоподобные проекции	Оксидативное повреждение
Дакроциты	Форма слезы	Миелофиброз
Шистоциты	Неправильная форма, малые фрагменты
Акантоциты	2-10 неправильной формы, тупо-законченные проекции
Клетки мишени	Круглая складка мембраны в середине клетки	Обычно при полихромазии, возможно заболевания печени
Агглютинация	Трехмерное склеивание эритроцитов	IMHA
Монетные столбики	Формирование эритроцитов в линейный цепи	Повышение белка плазмы по причине воспаления
Изменение размеров
Анизоцитоз	Вариации размеров эритроцитов	Связано с полихромазией
Макроциты	Большие эритроциты
Микроциты	Малые эритроциты
Включения
Базофильная зернистость	Малые, голубые вкрапления различного размера
Тельца Хауэла-Джолли	Единичные, малые круглые остатки ядерного материала.
Тельца Хейнца	Устойчивые выступы мембраны	Оксидативное повреждение
Ядерные эритроциты	Эритроциты с остатком ядра
Изменения цвета
Полихроматофилы	Большие голубые эритроциты	Связано с полихромазией
Гипохромные клетки	Недостаток гемоглобинации	Дефицит железа

IMHA – иммуноопосредованная гемолитическая анемия

Индексы эритроцитов

Средний клеточный объем (MCV) – средний размер эритроцита в фемолитрах (fL). Данный показатель может быть подсчитан непосредственно на анализаторе или исходя из формулы (гематокрит х 10)/(количество эритроцитов х 10⁶). Популяция малых эритроцитов — микроциты, популяция нормальных эритроцитов — нормоциты, и больших эритроцитов — макроциты.

Средняя концентрация гемоглобина (MCHC) вычисляет соотношение концентрации гемоглобина относительно гемактокрита. MCHC (г/дл) = (концентрация гемоглобина х 100) / гематокрит. В зависимости от этого показателя, эритроциты могут быть нормохромными, гипохромными и гиперхромными. Гиперхромные эритроциты в норме не встречаются, но могут отмечаться при гемолизе, липемии или формировании телец Хайнца.

Широта распространения эритроцитов (RDW) получается на автоматическом гематологическом анализаторе. Данный показатель связан с изменением размеров эритроцитов, анемия с большой популяцией макроцитов или микроцитов имеют повышенную широту.

Исследование костного мозга (аспират, биоптат).

Данный вид исследования показан в случаях отсутствия периферических признаков регенерации (ретикулоцитоз, полихромазия) или когда степень ответа не соответствует тяжести анемии. При цитологическом исследовании костного мозга проводится попытка оценки функции производства эритроидной функции — норма, гипоплазия или гиперплазия.

Морфологическая классификация анемии.

Морфологическая классификация обычно основывается на основании индексов эритроцитов, и снижение уровня эритроцитов может быть разделено на следующие виды:

1. Макроцитарная, гипохромная: регенеративная анемия.

2. Нормоцитарная, нормохромная: нерегенеративная анемия.

3. Макроцитарная нормохромная: ранний регенеративный ответ, дефектный эритропоэз, особенно при инфекции вирусом лейкоза кошек (ВЛК).

4. Микроцитарная гипохромная: железодефицитная анемия

5. Микроцитарная нормохромная: дефицит железа, портосистемный шунт.

Ниже представлены некоторый особенности данных видов анемий.

Нормоцитарная нормохромная анемия

Нормоцитарная нормохромная анемия отмечается как нерегенеративная анемия когда костный мозг высвобождает мало или вообще не высвобождает макроцитарные ретикулоциты. Большинство эритроцитов в мазке нормоцитарные нормохромные оставшиеся от предшествующей продукции. Анемия по причине геморрагии или гемолиза со сроком развития 1-2 дня часто предшествуют регенеративному ответу, она также также нормоцитарная и нормохромная и классифицируется как пре-регенеративная.

Макроцитарная гипохромная анемия.

Макроцитарная гипохромная анемия обычно указывает на регенеративную анемию с повышенным количеством ретикулоцитов. Ретикулоциты относительно больше (пр. макроцитарные) чем зрелые эритроциты. Ретикулоциты гипохромны поскольку в них не закончен синтез гемоглобина. Один автор верит что макроцитарные гипохромные эритроциты с недостатком рибосом (не ретикулоциты) все еще поздний регенеративный ответ, отражающий повышенный эритропоэз.

Микроцитарная гипохромная анемия

Микроцитарная гипохромная анемия часто отмечается при дефиците железа, что предотвращает адекватную продукцию гемоглобина. Эритроциты малы при значительной продукции гемоглобина. Микроцитоз и нарушенный метаболизм железа — характерен для собак с портосистемным шунтом и атрофией печени. Микроцитарная гипохромная анемия связанная с сидеробластной анемией — некоторый тип миелодиспластического синдром у собак. Японская акита, шиба ину и некоторые другие породы имеют эритроциты меньше по размеру.

Макроцитарная нормохромная анемия

Слишком много подчеркиваний на дефицит витамина В12 или фолата вызывающих макроцитарную гипохромную анемию пришли в ветеринарную медицину как результат экстраполяции из гуманной медицины. Макроцитарные нормохромные эритроциты при данном дефиците не отмечаются ни у кошек ни у собак, но характерны для людей и приматов. У животных макроцитоз кроме регенеративного ответа, вызывают такие патологии как инфекция ВЛК и миелодиспластический синдром не связанный с дефицитом витамина В12 и фолата.

Ниже приводится суммирующая таблица характерных лабораторных изменений при регенеративной и нерегенеративной анемий кошек и собак.

Таблица. Регенеративный и нерегенеративный ответ на анемию кошек и собак.

Лабораторный параметр	Регенеративная анемия	Нерегенеративная анемия
Ретикулоциты
– абсолютное число	>60,000/mL
– процент	>1% собаки, >0.5% кошки
– корректированный процент ретикулоцитов	>1
– индекс продукции ретикулоцитов	>1
Периферический мазок крови
	Полихромазия	Недостаток полихромазии
	Анизоцитоз	Недостаток анизоцитоза
	± ядерные эритроциты (малое количество)	Отсутствие ядерных эритроцитов до развития повреждения костного мозга, отравления свинцом или миелопролиферативных заболеваний
	± Тельца Хауэла-Джоли	Скудно или не представлены
	Базофильная зернистость	Не представлена
	Макроциты	Нормоциты
	Гипохромные клетки	Нормохромные клетки
	Клетки мишени	Отсутствуют
Индекс эритроцитов	Макроцитарная гипохромная	Нормоцитарная нормохромная
Цитология костного мозга	Эритроидная гиперплазия	Норма или эритроидная гипоплазия